【解析】构建载体需要限制酶和DNA连接酶，A错误;③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到④的染色体上，B错误;染色体上含有目的基因，但目的基因也可能不能转录或者不能翻译，或者表达的蛋白质不具有生物活性，C错误;植株表现出抗虫性状，说明含有目的基因，属于基因重组，为可遗传变异，D正确。

(江苏卷)23.下列关于基因工程技术的叙述，错误的是

A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列

B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应

C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为 筛选标记基因

D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达

【答案】ABC

【解析】限制性核酸内切酶大多是特异性识别6个核苷酸序列，但也有识别序列由4、5或8个核苷酸组成的，A错误;PCR中耐高温的DNA聚合酶只是在延伸阶段发挥催化作用，B项错误;载体质粒上抗生素抗性基因可作为标记基因，供重组DNA的鉴定和选择，不是抗生素合成基因，C错误;目的基因导入了受体细胞不一定就都能正常表达，D正确。

(2014山东卷)36.(12分)【现代生物科技专题】人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

(1)htPA基因与载体用_________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_________技术。

(2)为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。

(3)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行__________。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的__________。

(4)若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

36.【答案】(1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶); DNA分子杂交(或核酸探针)

(2)超数排卵; 获能(处理)

(3)显微注射法; 性别鉴定; 全能性

(4)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)