3、常用的消毒与灭菌的方法

（1）消毒的方法:

a、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min。

b、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min或 80 ℃ 下煮15min。

c、化学药剂消毒法:用75%酒精进行皮肤消毒;氯气消毒水源。

d、紫外线消毒 。

（2）灭菌的方法:

a、灼烧灭菌

b、干热灭菌：160-170 ℃下加热1-2h

c、高压蒸气灭菌：100kPa、121 ℃下维持15-30min

1、学生听教师讲解，讨论思考无菌操作的内容如下：

a.实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和和消毒;

b.将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌 ;

c.为避免周围环境中微生物污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行;

d.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触 。

2、了解消毒与灭菌的概念及两者的区别。并完成下面表格。

比较项

作用强度

消灭微生物的数量

芽孢孢子能否被消灭

消毒

较为温和

部分活状态的微生物

不能

灭菌

强烈

全部微生物

能

3、学生结合日常生活经验，了解常用的消毒与灭菌的方法，

学生通过学习无菌技术，培养学生动手能力，并且将课本知识与生活相结合，了解无菌技术在生活上的应用，培养学生的学科素养。

实验设计

 

1、教师讲解微生物实验室培养的基本操作程序包括：

a.器具的灭菌

b.培养基的配制

c.培养基的灭菌

d.倒平板

e.微生物接种

f.恒温箱中培养

g.菌种的保存

学生在教师指导下阅读课本，并讨论微生物实验室培养的基本操作程序有哪些 。

1、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

2、纯化大肠杆菌

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

1、教师结合课本P17侧边资料，讲解制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的基本成分。

2、教师演示制备牛肉膏蛋白胨固体培养基步骤是：

a.计算：根据培养基配方比例，计算配制100ml的培养基，各种成分用量。

b.称量：准确称取各种成分。

c.溶化：将称好的牛肉膏加少量水溶化后，加入称量好的蛋白胨、氯化钠、琼脂加热溶解，并补加蒸馏水定容至100ml。

d.灭菌：将配置好培养基转移到锥瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养基用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。

e.倒平板：待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。

1、教师讲解接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。

2、倒平板操作

3、平板划线操作

4、系列稀释操作

5、涂布平板操作

5、涂布平板操作

1、学生结合必修1“分子与细胞”第二章第1节细胞中的元素和化合物知识，让学生从生物体构成的基本元素这一角度理解牛肉膏蛋白胨固体培养基中的成分。

2、学生听教师讲解演示，并注意观察其中的操作步骤。

3、学生思考讨论下列问题：