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2014-02-18
各科成绩的提高是同学们提高总体学习成绩的重要途径,大家一定要在平时的练习中不断积累,小编为大家整理了高中生物DNA的粗提取与鉴定实验方法步骤比较,希望同学们牢牢掌握,不断取得进步!
项目
方法步骤
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添加物质及目的
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操作要求及目的
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取用与要求
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目的
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要求
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目的
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制备鸡血细胞液(教师准备)
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取0.1g/mL的柠檬酸钠100mL于500mL烧杯中,加鸡血180 mL
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抗凝
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缓慢搅拌
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混匀血液与柠檬酸钠,防血凝
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离心或置于冰箱
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使血细胞与血浆分离
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1.提取鸡血细胞的细胞核物质
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20mL蒸馏水
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促进血细胞吸水破裂,释放核物质
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搅拌:单向、快速、5min
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加速血细胞破裂
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过滤:1-2层纱布
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滤取含DNA的滤液
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2.溶解细胞核内的DNA
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2mol/L的 NaCl溶液40mL
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溶解DNA
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搅拌:单向、缓慢、1min
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促进DNA溶解
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3.析出含DNA的黏稠物
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加蒸馏水至黏稠物不增加为止
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降低NaCl溶液浓度,析出DNA
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搅拌:单向、轻轻
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混匀溶液,促进析出完整DNA分子
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4.滤取含DNA的黏稠物
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3层~4层纱布过滤
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获取含DNA的黏稠物
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5.将DNA的黏稠物再溶解
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2mol/L的 NaCl
溶液20mL
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再溶解DNA
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单向搅拌
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使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中
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6.过滤含有DNA的氯化钠溶液
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3层~4层纱布过滤
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滤取含DNA的滤液
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7.提取含杂质较少的DNA
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加入冷却的、体积分数为95%的酒精50mL
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让部分杂质溶于酒精,析出含杂质较少的DNA
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搅拌:单向
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促进杂质溶解、DNA析出
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用玻璃棒卷起丝状物,用滤纸吸水
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获得DNA(白色乳状丝状物)
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8.DNA的鉴定
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向2支20 mL试管各加0.015mol/L的NaCl溶液
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一支对照,一支溶解DNA(作溶媒)
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搅拌
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促进DNA溶解
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各加4mL二苯胺试剂
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作为DNA鉴定剂
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沸水浴5 min,冷却观察颜色
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DNA所在试管溶液变蓝色
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标签:高中生物实验
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