高中生物实验探索淀粉酶对淀粉和蔗糖水解的作用

高中生物实验一、教学目的

 1.初步学会探索酶催化特定化学反应的方法。

 2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化学反应。

二、实验原理

1.   根据酶作用的“钥匙与锁”理论，酶对彻底的选择具有专一性，如淀粉酶只能催化淀粉水解而不能催化蔗糖水解。

2.   还原性糖与斐林试剂反应生成砖红色沉淀。

RCHO ＋ Cu2+    →    RCOO— ＋ Cu2O↓

三、  实验试剂的准备

(1)质量分数为2%的新鲜淀粉酶：

a.称取2g淀粉酶（可从市场购买） b.将淀粉酶溶于98ml清水中 c.低温冷藏备用

可代替溶液： 唾液淀粉酶溶液

 (2)斐林试剂：

a．配制5%NaOH和3%CuSO4溶液

b.向5%NaOH中加入等量3%CuSO4溶液，混合均匀即可。

(3)可溶性淀粉（3%）：3g可溶性淀粉＋97ml水加热溶解，冷却后备用。配制淀粉溶液时，要先将淀粉溶解于少量的冷水中，再用开水定量，以达到所要求的浓度，如果溶液仍混浊不澄清，就应把配好的溶液煮沸约2分钟，直到澄清为止。

(4)3%的蔗糖溶液：3g蔗糖＋97ml水加热溶解，冷却后备用。

四、步骤

1、取2支洁净的试管，编上号，并且分别按下表中序号1至3的要求操作。

2、轻轻振荡这2支试管，使试管内的液体混合均匀。然后，将2支试管的下半部浸到60℃左右的热水中，保温5min。

3、取出试管，在其中各加入2ml斐林试剂（边加入斐林试剂，边轻轻振荡试管，以便使试管内的物质混合均匀）。

4、将3支试管的下半部放进盛有热水的大烧杯中，用酒精灯加热，煮沸1min。

5、观察这3支试管中溶液颜色的变化情况。

五、注意事项

1、实验前坚持必须检查蔗糖纯度，蔗糖溶液浓度为0.03g/ml为宜（浓度过大会影响其正常的颜色反应，而影响实验效果），且蔗糖宜现配现用（实验前配制即可）

2、淀粉溶液容易变质，要现配现用。

3、淀粉酶不能长期保存，也要现配现用，以确保酶的活性。

4、热水浴宜先准备好，以便缩短实验时间。

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