生物高中实验DNA的粗提取与鉴定

生物高中实验一、教学目的

1.初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。

2.观察提取出来的DNA物质。

二、注意事项

1.制备鸡血细胞液时，要在去新鲜鸡血的同时加入抗凝剂，使血液分层，取下层血细胞沉淀。另外，此实验的材料不能用哺乳动物(如人、狗)的血替代。

2.获取较多DNA的关键是向鸡血细胞液加入足量的蒸馏水，以便使细胞膜和核膜破裂，核内物质释放出来。

3.特别要注意实验中的3次过滤：第一次过滤的目的是为了除去血细胞破裂后残余的膜碎片以及细胞器碎片，第二次过滤(加水稀释NaCL)是为了初步将DNA与溶解在NaCL溶液中的蛋白质等有机物以及其他杂质分离，第三次过滤 (用酒精)是为了进一不除去蛋白质等有机物，从而得到较纯净的DNA. 第一、三次过滤要用滤液，使用的纱布为1~2层;第二次过滤要用滤出的粘稠物，使用的纱布是多层。

4.实验中有6次搅拌，除最后一次搅拌外，前5次搅拌均要朝向一个方向，并且在析出DNA,DNA再溶解和提取中，各步搅拌都要轻缓，玻璃棒不要直插烧杯底部，防止DNA分子断裂。

5.特别注意实验中有两次使用蒸馏水：一次在第1步，加水是为了使血细胞洗水膨胀破裂，加水后必须充分的搅拌，不应少于5min，使血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是在第3步，加水是为了稀释氯化钠溶液。

6.实验中有三次加氯化钠溶液。在步骤2中，当加入氯化钠后，必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中。在步骤5中，加氯化钠溶液也是为了DNA的再度溶解，不过这时溶液中蛋白质含量已很少。在步骤8中，加的氯化钠溶液的浓度比前2次低的多，但还是为溶解DNA。

7.在步骤7中，必须使用冷的酒精。

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