由阿伦膦酸钠的分子结构(图一)可知，阿伦膦酸含有两个膦酸基团和一个羟基，极性强，易电离，不能在C18柱和反向色谱柱上保留;由于阿伦膦酸结构中也没有生色团，不能直接用常规的紫外检测器和荧光检测器。我们可以使用示差折光检测器直接进行阿伦膦酸钠的HPLC分析，或者是使用导电检测器进行阿伦膦酸钠离子色谱检测及间接的UV检测。下面就详细介绍紫外检测的HPLC法和示差折光检测的HPLC法。?

3.1 紫外检测的HPLC:通过在流动相中加入紫外吸收剂或生成具有紫外吸收的阿伦膦酸钠衍生物,从而使用间接紫外检测,建立阿伦膦酸钠的紫外检测HPLC。Rolf[12]等建立了阴离子柱在线衍生生成紫外吸收的物质的检测方法。该方法中二膦酸盐在酸性条件下与Cu 2+络合后用紫外检测。该法研究了pH值，Cu 2+浓度，硝酸浓度对不同二膦酸盐滞留时间的影响。同时也检测了阿伦膦酸钠在线衍生物络合洗脱的滞留时间。其中阿伦膦酸的滞留能力是0.48.?

在线配位紫外检测HPLC是一种简单灵敏度提高色谱分离度和检测灵敏度的方法。与其他方法相比，其优点如下：①应用了较常用的，稳定的紫外检测方法，提高了检测灵敏度和精密度。②流动相中 Cu 2+的存在使分析物得以保留，能将双膦酸盐类化合物从不同性质的组分中分离出来。③此方法具有特异性，只有灵敏地检测到与Cu 2+有较强配位能力的分析物。?

美国药典提出了一种阿伦膦酸钠色谱纯度测量方法，以柠檬酸钠二水合物和无水磷酸氢二钠的水溶液作为缓冲溶液，再以该缓冲溶液与乙腈不同配比作为流动相进行梯度洗脱。?

3.2 示差折光检测到HPLC:示差折光检测器是利用组分与流动相的折射率之差进行检测。虽是通用性检测器，但只对少数类别物质的检测灵敏度高，且受环境温度影响较大。Yieng[13]等使用Waters IC-Pak HR阴离子交换柱，以硝酸为流动相示差折光检测阿伦膦酸钠。结果表明该法准确，专属性强。检测最底线比间接紫外检测最低还低。谢智远[14]等用阴离子交换柱，使用折光检测器检测了阿伦膦酸的含量，简化了方法，且快捷，专属性强，结果准确可靠。但唯一不足的是折光检测器的灵敏度稍差。?

4 讨论

阿伦膦酸作为二十一世纪最具潜力的骨质疏松症药物已经在临床用药中显示出来良好的效果，能够有效的治疗绝经期妇女骨质疏松，也可用于变形性骨炎。但其口服生物利用度不高，与血浆蛋白结合率为22%，并且还会出现食管炎，静脉推注时发热等不良反应。所以可以通过对阿伦膦酸钠进行结构修饰或衍生化，或者改变药物剂型的方法提高药物的生物利用度，减少不良反应。?

现在骨质疏松症是一个世界范围的，越来越引起人们重视的健康问题。目前全世界约有2亿人患有骨质疏松症，其发病率已跃居常见病，多发病的第七位。所以深入对阿伦膦酸钠药物的研究具有很大的意义。

参考文献