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丹参中脂溶性成分的提取方法的探讨

【摘要】目的 丹参中脂溶性成分丹参酮ⅡA是丹参制剂中重要的活性成分，也是成品的主要检测指标，通过对丹参酮ⅡA提取方法的研究，对丹参制剂提取工艺的优化具有重要的现实意义。方法 根据当前丹参制剂的生产工艺出发，在提取时间、溶媒倍数、提取温度、溶媒浓度等方面进行筛选试验，利用高效液相色谱法进行含量测定。结果 丹参的最佳提取重要条件为，4倍量90%的乙醇，70℃温浸1.5小时，通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法，干燥过程同样采用低温减压浓缩的丹参提取物中丹参酮ⅡA转移率超过50%。结论 本方法简便，快速，利于有效成分保留，适用于丹参中脂溶性成分的提取，对于丹参制剂的生产工艺优化有指导意义。

【关键词】丹参酮ⅡA 提取方法 工艺优化

丹参为唇形科鼠尾草，属多年生草本植物丹参的干燥根，其活性成分可分为脂溶性成分和水溶性酚酸成分，前者主要包括丹参酮ⅡA、丹参酮I和隐丹参酮等;后者主要包括丹参素、原儿茶醛、咖啡酸、丹酚酸B和丹酚酸C等[1]。本文以脂溶性成分丹参酮ⅡA为指标对提取方法进行研究。丹参酮ⅡA在临床上具有很好的药理活性，有抗凝血、促纤溶作用[2]。我们以丹参酮ⅡA这一活性成分为指标，从提取时间、提取溶媒倍数、提取温度、提取溶媒浓度等方面进行试验，以筛选提取条件，为提取工艺优化奠定基础。

1 药品与试剂

丹参(蓟县野生药材)，丹参酮ⅡA对照品(购于中国药品生物制品检定所)，甲醇(分析纯)、乙醇(药用级)、蒸馏水。

2 方法

2.1色谱条件的确定 高效液相色谱仪：SP-8100。色谱柱：YMC C18分析柱(4.6mm×150mm)。流动相：甲醇-水(75∶25)。检测波长：270nm。流速：1ml/min。

2.2对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品，用分析甲醇配制成浓度为0.0502mg/ml的对照品溶液。

3 试验及结果

3.1试验用丹参药材中丹参酮ⅡA的含量测定 取丹参粉末(过三号筛)0.3g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇50ml，密塞，称定重量，加热回流1小时，放冷，密塞，再称定重量，用甲醇补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测得的丹参药材中丹参酮ⅡA含量为0.53%。

3.2提取时间对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，在水浴中回流(微沸)不同的时间，滤过，滤液置200ml容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液加至刻度，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液。按上述检测方法进行含量测定，通过实验可以看到提取丹参的时间在0.5小时至1.5小时，所得到的提取液中丹参酮ⅡA的含量没有显著变化，当提取时间延长至2.0小时时，提取液中丹参酮的含量反而下降，所以提取时间应不超过1.5小时。 3.3溶媒倍数对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，分别加入不同量的乙醇溶液，水浴回流1.5小时(微沸)，滤过，滤液置不同量的容量瓶中，放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上检测方法进行含量测定，提取所用溶媒倍数超过4倍时，提取液中丹参酮ⅡA的含量并没有明显的提高，从经济上考虑，选择4倍量是比较合理的。

3.4提取时温度对丹参酮ⅡA含量的影响 取六份丹参药材，每份50g，各加乙醇溶液200ml，分别在不同温度的水浴中提取1.5小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定，提取温度试验表明，提取温度在低于70℃时，提取液中丹参酮的含量随温度的升高而增加，超过70℃时，提取液中丹参酮ⅡA的含量随温度的升高反而下降。

3.5醇浓度对丹参酮ⅡA含量的影响 取四份丹参药材，每份50g，加入不同浓度的乙醇溶液各200ml，在70度水浴中温浸1.5小时，滤过，滤液置200ml容量瓶中放至室温，用相应浓度的乙醇溶液定容，混匀，取少量上述溶液离心，取上清液作为供试品溶液，按上述检测方法进行含量测定，提取时溶媒浓度越高，提取液中丹参酮含量也越高，但90%的醇提液与95%的醇提液中丹参酮ⅡA含量没有大的变化，所以提取时可以采用90%的醇代替95%的醇。

4 讨论

4.1由以上结论可见，丹参的最佳提取条件为：4倍量90%的乙醇，70℃温浸1.5小时。通过实验证明采用以上所述的丹参提取方法，干燥过程同样采用低温减压干燥得到的丹参提取物中丹参酮ⅡA有50%以上能被保留下来。

4.2关于丹参药材我们也做了多品种考察，在此不做详述，但比较中我们认为，天津蓟县和周边地区所产野丹参中含量最佳，故以其为研究对象。

参考文献

[1]膝艳芬，王峥涛，余国奠.丹参的药用资源研究进展，中国野生植物资源，2001，20(2)：1.

[2]柴瑞震.丹参的药理研究近况.中国中医药科技,2003,10(6):390～392.(

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