2012执业药师考前辅导:高效液相色谱法

2012-09-25 13:49:32 字体放大:  

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(二)塔板理论:

塔板理论方程式(高斯方程式):

理论塔板式数: 理论塔板高度:

(三)速率理论: H=A+B/u+Cu

影响塔板高度的因素:1、涡流扩散 2、纵向扩散 3、传质阻抗

二、气相色谱仪:

(1)色谱柱:固定相与柱管组成。 填充柱、毛细管柱; 分配柱、吸附柱

(2)固定液:高沸点的液体,操作下为液态。 甲基硅油、聚乙二醇等

选择原则:按相似性、按主要差别、按麦氏差别选择。

(3)载体:化学惰性的多孔性微粒

(4)毛细管色谱柱:开管型、填充型

(5)检测器:1、浓度型检测器:热导检测器和电子捕获检测器

2、质量型检测器:氢焰离子化检测器

中国药典2000对气相色谱规定:除检测器种类、固定液品种及特殊指定的色谱柱材料不得任意更改外,其他均可适当改变,色谱图于30min内记录完毕。

第四节 高效液相色谱法

1、 基本原理:影响柱效的主要因素是涡流扩散和传质阻抗。

分类:1、液固吸附色谱法:流动相为液体,固定相是固体吸附剂。

2、液——液分配色谱法:固定相几乎全是化学键合硅胶,又称化学键合相色谱法。

按固定相和流动相的极性2又分:正相色谱法和反相色谱法

正相色谱法:流动相极性小于固定相极性的色谱法。用于分离溶于有机溶剂的极性及中等极性的分子型物质,用于含有不同官能团物质的分离。 极性弱组分先流出

反相色谱法:……………大于……………………… 用于分离非极性至中等极性的分子型化合物

2、 高效液相色谱仪:

1、高压输液泵 2、色谱柱 3、进样阀

4、检测器:紫外吸收检测器、荧光检测器、差示折光检测器、电化学检测

中国药典2000对高效液相色谱法规定:除固定相种类、流动相组分、检测器类型不得任意更改外,其余均可适当改变,色谱图于20min内记录完毕。

第五节 色谱系统适用性试验和定量分析方法

一、系统适用性试验

1、 色谱柱的理论板数:

2、 分离度:应大于1.5

3、重复性

3、 拖尾声因子:0.95-1.05之间

二、定量测定法:

1、内标法加较正因子测定供试品中某个杂质或主成分含量

2、外标法测定供试品中某个杂质或主成分含量

3、加较正因子的主成分自身对照法

不加较正因子的主成分自身对照法

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