2014年三级公共营养师考试要点归纳:维生素A测定
维生素A的测定方法
维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用,产生蓝色物质,其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。
比色法
1.原理
维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑相互作用,产生蓝色物质,其深浅与溶液中所含维生素A的含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定其吸光度。
2.仪器
实验室常用设备 分光光度计 回流冷凝装置
3.试剂
本实验所用试剂皆为分析纯,所用水皆为蒸馏水
(1) 无水硫酸钠 Na2SO4
(2) 乙酸酐
(3) 乙醚 不含有过氧化物
(4) 无水乙醇 不含有醛类物质
(5) 三氯甲烷 应不含分解物,否则会破坏维生素A
检查方法:三氯甲烷不稳定,放置后易受空气中氧的作用生成氯化氢和光气。检查时可取少量三氯甲烷置试管中加水振摇,使氯化氢溶到水层。加入几滴硝酸银溶液,如有白色沉淀即说明三氯甲烷中有分解产物。
(6) 25%三氯化锑-三氯甲烷溶液 用三氯甲烷配制25%三氯化锑溶液,储于棕色瓶中(注意避免吸收水分)
(7) 50%氢氧化钾溶液(KOH) W/V
(8) 维生素A标准液 视黄醇(纯度85% Sigma)用脱醛乙醇溶解维生素A标准品,使其浓度大约为1ml相当于1mg视黄醇。临用前用紫外分光光度法标定其准确浓度。
(9) 酚酞指示剂 用95%乙醇配制1%溶液
4. 操作步骤
维生素A极易被光破坏,实验操作应在微弱光线下进行。
4.1样品处理:根据样品性质,可采用皂化法或研磨法。
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