2013公共营养师二级食品分析:维生素C的测定

2013-11-11 09:54:49 字体放大:  

⑸ 0.001N KIO3标液:吸0.1N KIO3溶液5ml→于500ml容量瓶内→加水至刻度,每毫升相当于VC0.008mg;

⑹ 0.5%淀粉溶液;

⑺ 6%KI溶液;

3、操作方法

⑴ 提取:称样50g→加2%草酸100ml→到入捣碎机中→处理→过滤→颜色若深可加白陶土

⑵ 滴定:吸5ml样液→于三角瓶→用染料滴定至粉红色→15秒内不褪色

计算:

VC(mg/100g)=(V × T)/ W × 100

V -消耗染料体积(ml)

T -1ml染料所能氧化维生素C的毫克数

W- 滴定时所有滤液中含有样品的克数

4、注意事项

⑴ 所有试剂的配制最好都用重蒸馏水;

⑵ 滴定时,可同时吸二个样品。一个滴定,另一个作为观察颜色变化的参考;

⑶ 样品进入实验室后,应浸泡在已知量的2%草酸液中,以防氧化,损失维生素C;

⑷ 贮存过久的罐头食品,可能含有大量的低铁离子(Fe2+),要用8%的醋酸代替2%草酸。这时如用草酸,低铁离子可以还原2,6-二氯靛酚,使测定数字增高,使用醋酸可以避免这种情况的发生;

⑸ 整个操作过程中要迅速,避免还原型抗坏血酸被氧化;

⑹ 在处理各种样品时,如遇有泡沫产生,可加入数滴辛醇消除;

⑺ 测定样液时,需做空白对照,样液滴定体积扣除空白体积。

二、2,4-二硝基苯肼法

可测总抗坏血酸,总抗坏血酸包括还原型、脱氢型和二酮古乐糖酸型。此法是将样品的还原型抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸,然后与2,4-二硝基苯肼作用,生成红色的脎。脎的量与总抗坏血酸含量成正比,将红色脎溶于硫酸后进行比色,由标准曲线计算样品中总VC。

1、原理:

用酸处理过的活性碳把还原型的抗坏血酸氧化为脱氢型抗坏血酸,在继续氧化为二酮古乐糖酸。

二酮古乐糖酸与2,4-二硝基苯肼偶联生成红色的脎,其成色的强度与二酮古乐糖酸浓度呈正

比,可以比色定量。

2、步骤

⑴ 样品处理与分析

称一定样 → 加等量2%草酸 → 于高速捣碎机捣碎 → 取匀浆20g → 用1%草酸定容100ml → 过滤 → 取滤液10ml → 加1%草酸10ml → 加少量活性炭 → 摇1分钟 → 静置过滤 → 各取滤液2ml于样品管和样品空白管 → 各管加入1滴硫脲溶液 → 于样品管中加入2,4-二硝基苯肼0.5ml → 分别于两个管加盖 → 于37℃保温箱3小时 → 取出后样品管放入冰水中 → 样品空白管取出后冷至室温 → 在样品空白管加入2,4-二硝基苯肼 → 0.5ml → 样品管和空白管都于冰浴中 → 滴加85%H2SO42ml于各管中 → 边滴边摇 → 防止温度升高炭化后呈黑色 → 冰浴中30分钟后取出 → 室温下放置30分钟后,在540nm测消光值,从标准曲线上查出相应的含量

⑵ 标准曲线的绘制

取5个50ml容量瓶编号 1 2 3 4 5

加VC标液0.2mg/ml 10 20 30 40 50ml

取5个比色管取相应 2 2 2 2 2

加硫脲溶液(滴) 1 1 1 1 1

2,4-二硝基苯肼(ml)0.5 0.5 0.5 0.5 0.5

于37℃保温箱3~4小时,取出于冰浴中,然后滴加85%硫酸2.5ml→取出放30分钟→在540nm下测各消光值绘标准曲线,同时做空白。

计算:每百克食品中抗坏血酸的毫克数=C/W *100

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