二、非选择题

7.科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。

(1)可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的体外抗菌特性。抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供________和________。

(2)分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的______，确定该蛋白质的抗菌效果。

(3)细菌培养常用的接种方法有________和________。实验结束后，对使用过的培养基应进行________处理。

解析：将抗菌蛋白加入金黄色葡萄球菌培养基后，可根据菌落多少来判断其抗菌效果。

答案：(1)碳源　氮源　(2)数量　(3)平板划线法　稀释涂布平板法(稀释混合平板法)　灭菌

8.苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株。筛选的主要步骤如下图所示：①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的选择培养基中应加入________作为碳源。②中不同浓度碳源的培养基__________(A.影响;B.不影响)细菌的数量。如果要测定②中活细菌数量，常采用________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长、在⑤中生长。④与⑤培养基的主要区别在于________;使用________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时为什么进行倒置培养?

(3)如何比较不同菌株降解苯酚能力的大小?

(4)实验过程中如何防止其他微生物的污染?

解析：本题考查细菌的分离技术。题目中所筛选的细菌“只能”降解苯酚，故可采用以苯酚为唯一碳源的选择培养基筛选，含除苯酚外其他碳源的培养基作为对照。培养液中苯酚浓度下降的速度可反映该菌对苯酚的降解能力，严格灭菌、无菌操作可有效防止实验过程中的杂菌污染。

答案：(1)苯酚　A　平板菌落计数(活菌计数或菌落计数)

(2)④含除苯酚外的其他碳源，⑤以苯酚为唯一碳源　平板分离(稀释涂布平板或平板划线分离)　避免培养过程产生的水分影响微生物的生长

(3)用同样苯酚浓度的培养液培养不同菌株，一定时间后，测定培养液中苯酚含量

(4)培养基灭菌，接种环境灭菌，接种过程无菌操作

9.(2011年青岛质检)从自然菌样筛选较理想生产菌种的一般步骤是：采集菌样→富集培养→纯种分离→性能测定。

(1)不同微生物的生存环境不同，获得理想微生物的第一步是从适合的环境采集菌样，然后再按一定的方法分离、纯化。培养噬盐菌的菌样应从________环境采集。

(2)富集培养指创设仅适合待分离微生物旺盛生长的特定环境条件，使其群落中的数量大大增加，从而分离出所需微生物的培养方法。对产耐高温淀粉酶微生物的富集培养应选择________的培养基，并在________条件下培养。

(3)下面两图是采用纯化微生物培养的两种接种方法接种后培养的效果图解，请分析接种的具体方法。

获得图A效果的接种方法是________，获得图B效果的接种方法是________。

(4)配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行___________，

接种前要进行________，在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在________条件下进行。

解析：噬盐菌的菌样应从高盐环境采集。微生物产生淀粉酶说明其碳源是淀粉，应选择以淀粉为唯一碳源的培养基，并在高温条件下培养。图A菌落分布较均匀，接种方法是稀释涂布平板法，图B菌落集中呈线状，接种方法是平板划线法。配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整pH，接种前要进行高压蒸汽灭菌，在实验中要注意在无菌条件下进行。

答案：(1)海滩等高盐　(2)以淀粉为唯一碳源　高温

(3)稀释涂布平板法　平板划线法　(4)pH调整　高压蒸汽灭菌　无菌

10.尿素是一种重要的农业肥料，但若不经细菌的分解，就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类、数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示。

请分析回答问题：

KH2PO4 1.4 g

Na2HPO4 2.1 g

MgSO4•7H2O 0.2 g

葡萄糖 10.0 g

尿素 1.0 g

琼脂 15.0 g

将上述物质溶解后，用蒸馏水定容到1 000 mL

(1)培养基中加入尿素的目的是筛选________，这种培养基属于________培养基。

(2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________，实验需要振荡培养，原因是__________________。

(3)转为固体培养时，常采用________的方法接种，获得单菌落后继续筛选。

(4)下列材料或用具中：①培养细菌用的培养基与培养皿;②玻璃棒、试管、锥形瓶和吸管;③实验操作者的双手。需要灭菌的是________;需要消毒的是________。(填序号)

(5)在进行分离分解尿素的细菌的实验时，A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有________(填序号)。

①由于土样不同　②由于培养基污染

③由于操作失误　④没有设置对照

(6)简述土壤中可分解尿素细菌的鉴定方法及原理： _____________。

解析：(1)培养基中加入尿素能够筛选出能分解尿素的细菌，属于选择培养基。(2)尿素为该细菌提供氮源，葡萄糖为该细菌提供碳源。振荡培养基可融入氧气，为培养的目的菌提供必需的氧气。(6)培养基上筛选出的细菌数量与是否设置对照无关。

答案：(1)目的菌　选择

(2)尿素　葡萄糖　为目的菌提供氧气

(3)涂布平板(划线)

(4)①和②　③　(5)①②③

(6)在以尿素为惟一氮源的培养基中加入酚红指示剂，细菌合成的脲酶将尿素分解为氨，使培养基的碱性增强，pH增高，使酚红指示剂变红

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