编辑:sx_zhaodan
2014-07-17
高中生物实验知识:DNA的粗提取与鉴定实验
【摘要】精品学习网高中频道的编辑就为您准备了高中生物实验知识:DNA的粗提取与鉴定实验
一、不同试剂用途及原理比较
二、方法步骤比较
三、DNA的粗提取和鉴定实验中应注意的问题
1.盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。因为鸡血细胞破碎后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附,细胞内DNA的含量比较少,如果被玻璃窖吸附却一部分,提取的DNA就会更少。因此,实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以减少提取过程中DNA的损失。
2.获取较纯净的DNA的关键步骤。
⑴充分搅拌鸡血细胞液。DNA存在于鸡血细胞的细胞核中。将鸡血细胞液与蒸馏水混合后,必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌,使鸡血细胞加速破裂,并释放出DNA。
⑵沉淀DNA时必须用冷酒精。实验前必须准备好大量的体积分数为95%的酒精,并在冰箱中至少存放24h。
⑶正确搅拌含有悬浮物的溶液。实验步骤3、5、7都需要用玻璃棒搅拌。在进行步骤3、5时,玻璃棒不要直接接触烧杯底部,而且搅拌要轻缓,以便获得较完整的DNA分子。进行步骤7时,要将玻璃棒插入烧杯中溶液的中间,用手缓慢转动5min~10min。
3.本实验中鉴定DNA的方法为二苯胺法。如果在没有二苯胺的情况下也可以用以下几种方法。
⑴配制染色剂。用蒸馏水配制0.05%的溴化乙锭(EB)溶液。
⑵将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。
⑶将蜡纸放在紫外灯(260nm)下照射(暗室中),可见橙红色的荧光(DNA的紫外吸收高峰在260nm处)。
4.典例解析
1.下列关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验原理中,说法错误的是
A.DNA在氯化钠溶液中的溶解度随溶液浓度的变化而改变
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.DNA溶液中加入二苯胺试剂经沸水浴后会出现蓝色反应
解析:该实验依据的原理是A、B、D,DNA不溶于酒精(属有机溶剂),C说法错误。
答案:C
标签:高二生物知识点
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