对人类来说，生物太重要了，人们的生活处处离不开生物。精品学习网为大家推荐了高二生物下册微生物的培养与应用知识点，请大家仔细阅读，希望你喜欢。

【专题目标】

1.掌握培养基、消毒灭菌等有关微生物培养的基础知识，

2.掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术，

3.运用相关技术解决生产生活中有关微生物计数、微生物的分离与培养等实际问题。

【技术要项】

1.培养基的制备

2.高压蒸汽灭菌和干热灭菌

3.倒平板操作

4.平板划线操作和稀释涂布平板法

5.应用选择培养基分离某种特定的微生物

课题1 微生物的实验室培养

1.课标

了解有关培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。

2.重点难点

无菌技术的操作。

3.课题背景分析

培养微生物的要领，是为所需要的微生物提供良好的生存环境，同时阻止或抑制其他微生物的生长。

4.基础知识

(1)培养基

1.培养基的用途和种类，指出培养基可分为液体和固体两大类;

2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方;

3.尽管培养基的配方各不相同，但是其基本成分都包括水、碳源、氮源和无机盐。

(2)无菌技术

1.无菌技术的概念;

2.消毒与灭菌的概念及两者的区别;

3.常用的消毒与灭菌的方法，接种环灼烧灭菌的方法。

5.实验安排及注意事项

实验后，所有用过的培养基、培养液等都需要统一进行高压蒸汽灭菌后再丢弃，否则将会造成环境污染。

6.课题成果评价

(1)培养基的制作是否合格

如果未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的，否则需要重新制备。

(2)接种操作是否符合无菌要求

如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合大肠杆菌菌落的特点，则说明接种操作是符合要求的;如果培养基上出现了其他菌落，则说明接种过程中，无菌操作还未达到要求，需要分析原因，再次练习。

(3)是否进行了及时细致的观察与记录

培养12 h与24 h后的大肠杆菌菌落的大小会有明显不同，及时观察记录的同学会发现这一点，并能观察到其他一些细微的变化。这一步的要求主要是培养学生良好的科学态度与习惯。

7.答案和提示

1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的?

答：无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。

2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。

(1) 培养细菌用的培养基与培养皿

(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管

(3) 实验操作者的双手

答：(1)、(2)需要灭菌;(3)需要消毒。

(二)倒平板操作的讨论

1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度?

可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰?

通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置?

平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基，造成污染。

4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?

空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。

(三)平板划线操作的讨论

1.为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环?在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗?为什么?

操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物;每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

2.以免接种环温度太高，杀死菌种。

3.划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。

(四)涂布平板操作的讨论

涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想，第2步应如何进行无菌操作?

应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适、吸管头不要接触任何其他物体、吸管要在酒精灯火焰周围;等等。

(五)练习

1.可以从微生物生长需要哪些条件的角度来思考。例如，微生物的生长需要水、空气、适宜的温度，食品保存可以通过保持干燥、真空的条件，以及冷藏等方法来阻止微生物的生长。

2.可以从这三种培养技术的原理、操作步骤等方面分别进行总结归纳。例如，这三种培养技术都需要为培养物提供充足的营养，但无土栽培技术的操作并不需要保证无菌的条件，而其他两种技术都要求严格的无菌条件。