【解析】　(1)血红蛋白的提取和分离一般可分为四步，分别是样品处理、粗分离、纯化、纯度鉴定。(2)加入柠檬酸钠的目的是防止血液凝固。(3)①透析的目的是将样品中相对分子质量较小的杂质蛋白除去。②透析的原理是透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内。(4)样品纯化的目的是利用凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去。(5)成熟的红细胞没有细胞核及众多的细胞器膜，可以用于提取细胞膜。

【答案】　(1)样品处理　粗分离　纯化　纯度鉴定

(2)防止血液的凝固

(3)①将样品中相对分子质量较小的杂质蛋白除去

②透析袋能使小分子自由进出，而将大分子保留在袋内

(4)通过凝胶色谱法将相对分子质量大的杂质蛋白除去

(5)哺乳动物的成熟红细胞没有细胞核，没有线粒体等由膜构成的细胞器，这样提取的细胞膜相对较纯

7.(12分)(2014•连云港模拟)在遗传病治疗及刑侦破案中常需要对样品DNA进行分析，PCR技术能快速扩增DNA片段，在几个小时内复制出上百万份的DNA拷贝，有效地解决了因为样品中DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。据图回答相关问题：

a链5′—G—G……T—C—3′　5′—G—G—OH(引物Ⅰ)

b链3′—C—C……A—G—5′　________(引物Ⅱ)

95℃↓

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

55℃↓

5′—G—G—OH

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

72℃↓

________　　　________

(1)在相应的横线上写出引物Ⅱ，并在复性这一步骤中将引物Ⅱ置于合适的位置。

(2)在相应的横线上写出循环一次后生成的DNA分子。

(3)若将作为原料的四种脱氧核苷酸用32P标记，请分析循环一次后生成的DNA分子的特点：________________，循环n次后生成的DNA分子中不含放射性的单链占总单链的比例为________。

(4)PCR反应过程的前提条件是________，PCR技术利用DNA的________原理解决了这个问题。

(5)在对样品DNA进行分析的过程中发现，DNA掺杂着一些组蛋白，要去除这些组蛋白可加入的物质是________________________________________。

【解析】　(1)DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从3′端延伸DNA链，所以引物就提供了3′端，子链延伸方向为5′→3′，引物Ⅰ与b链部分碱基互补，引物Ⅱ则与a链部分碱基互补，且连接到a链的3′端，故引物Ⅱ的结构为5′—G—A—OH。

(2)经过一次循环后，产生的两个DNA分子分别含有引物Ⅰ和引物Ⅱ。

(3)由于作为原料的四种脱氧核苷酸被32P标记，所以新合成的子链均含有放射性，一次循环后的两个DNA各有一条链含32P，若复制n次，共产生DNA单链2n×2，其中只有DNA母链不含32P，则其所占比例为2/(2n•2)=1/2n。

(4)DNA复制是以两条母链为模板，按照碱基互补配对原则进行的。因此，首先要解旋，使两条母链的碱基暴露出来，才能按照碱基互补配对的原则把相应的碱基一个个地连接起来。DNA分子在80℃～100℃的温度范围内变性，双链解开成单链，当温度慢慢降低时，又能重新结合形成双链。

(5)利用酶的专一性，应加入蛋白酶，可除去DNA中掺杂的蛋白质。

【答案】　(1)

5′—G—A—OH

HO—A—G—5′　5′—G—G—OH

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

↓72℃

(2)

3′—C—C……A—G—5′　5′—G—G……T—C—3′

5′—G—G……T—C—3′　3′—C—C……A—G—5′

(3)每个DNA分子各有一条链含32P　1/2n

(4)DNA解旋　热变性　(5)蛋白酶

8.(14分)某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动，具体步骤如下。

材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24 h。

DNA粗提取：

第一步：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液，充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。

第二步：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入10 mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。

第三步：取6支试管，分别加入等量的质量浓度为2 mol/L的NaCl溶液溶解上述絮状物。

DNA检测：在上述试管中各加入4 mL二苯胺试剂，混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表。

材料保存温度 花菜 辣椒 蒜黄

20℃ ++ + +++

-20℃ +++ ++ ++++

注：“+”越多表示蓝色越深

分析上述实验过程，回答下面的问题。

(1) 该探究性实验的课题名称是：___________________________________________。

(2)第二步中“缓缓地”搅拌，这是为了减少________。

(3)根据实验结果，得出结论并分析。

①结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较多。

结论2：

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

②针对结论1，请提出合理的解释：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)氯仿密度大于水，能使蛋白质变性沉淀，与水和DNA均不相溶，且对DNA影响极小。为了进一步提高DNA纯度，依据氯仿的特性，在DNA粗提取第三步的基础上继续操作的步骤是：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________，

然后用体积分数为95%的冷酒精溶液使DNA析出。

【解析】　本题主要考查DNA粗提取的相关知识，意在考查实验与探究能力。如果DNA断裂，就不容易被提取出来;温度主要是通过影响酶的活性来影响生理过程;粗提取得到的DNA中含有少量的蛋白质，可以通过氯仿的特殊功能来去除蛋白质，提高DNA纯度。

【答案】　(1)探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响

(2)DNA断裂

(3)①等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多　②低温抑制了相关酶的活性，DNA降解速度慢

(4)将第三步获得的溶液与等量的氯仿充分混合，静置一段时间，吸取上清液

高三生物二轮酶的应用和生物技术专项训练试题就为大家介绍到这里，希望对你有所帮助。

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