4. [2012•课标全国卷]根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)限制性内切酶切割DNA分子后产生 的片段，其末端类型有________和________。

(2)质粒运载体用EcoR Ⅰ切割后产生的片段如下：

AATTC……G

G……CTTAA

为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可用EcoR Ⅰ切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是__ ___________________________________________。

(3)按其来源不同，基因工程中所使用的D NA连接酶有两类，即________DNA连接酶和________DNA连 接酶。

(4)反转录作用的模板是________，产物是________。

若要在体外获得大量反转录产物，常采用________技术。

(5)基因工程中除质粒外，________和________也可作为运载体。

(6)若用重组质粒转 化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_______________________

_________________________________________________________。

解析：(1)DNA分子经限制酶 切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一种限制酶切割产生的末端必须与EcoR Ⅰ切割产生的末端相同。(3)根据酶的来源不同，DNA连接酶分为E•coliDNA连接酶和T4DNA连接酶。(4)mRNA(或RNA)为模板，合成DNA的过程称为逆转录，若要体外获得大量DNA分子，可以使用PCR技术。(5)在基因工程中，通 常利用质粒作为运载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为运载体。(6)大肠杆菌作为受体细胞时，常用Ca2+处理，使之成为能吸收周围环境中DNA分子的感受态细胞。

答案：(1)黏性末端'平末端

(2)切割产生的DNA片段末端与EcoR Ⅰ切割产生的末端相同

(3)E•coli'T4

(4)mRNA(或RNA)'cDNA(或DNA)'PCR

(5)噬菌体' 动植物病毒

(6)未处理的大肠 杆菌吸收质粒(外源DNA)的能力极弱

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