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关于人参、三七在复方芪术调经散中的高效液相色谱法鉴别?

作者：何耀慧　林荣锋　陈剑平　李一圣　黄晓其　赖小平　苏子仁?

【摘要】 【目的】　建立芪术调经散中人参和三七的鉴别方法。【方法】以三七皂苷R?1和人参皂苷Rf为指标，采用高效液相色谱法对芪术调经散中人参和三七进行鉴别。【结果】通过利用人参特征性成分人参皂苷Rf和三七特征性成分三七皂苷R?1，并综合人参和三七中共有成分人参皂苷Rg?1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb?1，可对芪术调经散中人参和三七进行鉴别。【结论】该方法简便可行，可用于芪术调经散中人参和三七的同时鉴别。?

【关键词】 人参/化学;　三七/化学;　人参皂苷Rf/分析;　三七皂苷R?1/分析;　色谱法，高压液相?

人参和三七均为贵重中药材，人参有大补元气，复脉固脱，补脾益肺，生津，安神的功效，而三七有散瘀止血，消肿定痛的功效??[1]?。同时含有人参和三七的经典方屡见不鲜，但现有文献尚无有关复方中同时鉴别人参和三七的报道。对于复方制剂，同时鉴别人参和三七是保证其质量的必要条件，而人参和三七含有的成分极为相似，有效成分均为皂苷类成分，均含有人参皂苷Rg?1、人参皂苷Re及人参皂苷Rb?1，为鉴别增加了难度。本文以同时含有人参和三七两味药材，且制备工艺简单的芪术调经散作为研究对象，采用高效液相色谱(HPLC)法建立了芪术调经散中人参和三七的鉴别方法，现将研究结果报道如下。?

1　 材料?

1?1　仪器　?

DIONEX SUMMIT高效液相色谱仪(美国戴安公司);Hanest D2G?303A水艾科浦U系列纯化水机(重庆颐洋企业发展有限公司);舒美KQ5200DA型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);BP110s型万分之一电子天平(德国Sartorius公司) ;CP225D型十万分之一电子天平(德国Sartorius公司)。?

1?2　药物与试剂　?

人参皂苷Rf(中国药品生物制品检定所，批号：111719?200502 );人参皂苷Re(中国药品生物制品检定所，批号0754?200013);人参皂苷Rg?1(中国药品生物制品检定所，批号：110703?200424);人参皂苷Rb?1(中国药品生物制品检定所，批号：110704?200420);三七皂苷R?1(中国药品生物制品检定所，批号：110745?200313);甲醇、乙腈为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。?

2　方法和结果?

2?1　色谱条件　?

色谱柱：Waters YMC ODS (4?6?mm×50?mm);流动相：以乙腈为流动相A，以水为流动相B;流速为1?0?mL/min，按表1进行梯度洗脱;柱温为27?℃;检测波长为203?nm。?表1　梯度洗脱曲线?

2?2　对照品溶液的制备　?

取三七皂苷R?1对照品、人参皂苷Rg?1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rb?1对照品及人参皂苷Rf对照品适量，精密称定，加入甲醇分别制成三七皂苷R?1 0?201?mg/mL、人参皂苷Rg?1 0?940?mg/mL、人参皂苷Re 0?298?mg/mL、人参皂苷Rb?1 0?880?mg/mL及人参皂苷Rf 0?335?mg/mL的溶液，即得。?

2?3　对照药材溶液的制备　?

取人参药材1?g，精密称定，加三氯甲烷40?mL，超声处理1?h，滤过，药渣加适量水湿润后，加水饱和正丁醇10?mL，超声处理30?min，滤过，取上清液加30?mL氨试液，摇匀，放置分层，取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至1?mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即得人参对照药材溶液;同法制得三七对照药材溶液。?

2?4　供试品溶液的制备　?

取芪术调经散14?29?g，精密称定，加三氯甲烷100?mL，超声处理1?h，滤过，药渣加适量水湿润后，加水饱和正丁醇100?mL，超声处理30?min，滤过，取上清液加300?mL氨试液，摇匀，放置分层，取上层，蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至1?mL容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀即得。?

2?5　阴性样品溶液的制备　?