1 仪器、试药与实验动物

　　1.1 仪器与试药

　　美国 Agilent公司1100高效液相色谱仪，DAD检测器，色谱柱ZORBAx SB-C18(4.6 mm×250 mm,5 μm)，BF―2000氮气吹干仪(上海八方世纪科技有限公司)。吡喹酮原料药(上海菱玉贸易有限公司，9917%，批号0410031);吡喹酮标准品 (中国药品生物制品检定所);吡喹酮水凝胶栓剂(2%，本室研制);地西泮对照品 (中国药品生物制品检定所提供);泊洛沙姆(德国，BASF公司提供);乙腈、甲醇均为色谱纯;其他试剂均为分析纯。

　　1.2 实验动物

　　大白兔(由武汉大学医学院实验动物中心提供)，体质量(2.1±0.3) kg,雌雄各半。

　　2 实验方法及结果 1 色谱条件

　　色谱柱ZORBAxSB C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm) ，Agilent色谱工作站，DAD检测器; 流动相: 乙腈水(体积比70∶30);内标: 地西泮;检测波长:220 nm;灵敏度:0.02AUFS;流速:1.00 mL・min-1;纸速:0.25 cm・min-1。 2 标准溶液的制备

　　精密称取干燥至恒重的吡喹酮5.0 mg于100 mL量瓶中,加流动相溶解后用流动相稀释配成5 μg・mL-1的标准液。精密称取干燥至恒重的地西泮5.0 mg于100 mL量瓶中,加流动相溶解后用流动相稀释配成0.5 μg・mL-1的内标液。 3 血浆的处理

　　取空白血浆2份，各0.5 mL，置于10 mL具塞离心管中，其中1份加入适量吡喹酮标准液和20 μL内标液;各加入醋酸乙酯3 mL提取，振荡2 min，以3 000 r/min离心，取有机层经氮气吹干，残留物用100 μL流动相溶解，取20 μL进样。药物及内标物的保留时间分别为4.17和5.06 min,见图1。 4 标准曲线的制备

　　取空白血浆0.5 mL，分别置于6只10 mL具塞离心管中，加入不同量吡喹酮标准液和内标液20 μL，配成每1 mL含吡喹酮0.05、0.1、0.5、1、2、5、10 μg的溶液，按“2.3”项下，以吡喹酮与内标峰面积比值(A)对吡喹酮质量浓度(ρ)作线性回归,得标准曲线方程:A=-6.214 7+11.579 4ρ(r=0.997 3),最低检测浓度(S/N≥3)为0.05 μg・mL-1。