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贵州小型猪是贵阳中医学院经过十几代的闭锁繁育和人工选择,已形成外貌特征一致,生产性能稳定的优良小型猪群体,为了探讨其群体遗传结构及遗传特征,我们对贵阳中医学院选育的小型猪的血液蛋白质多态性进行了分析,以期从生化遗传角度揭示其群体遗传特征,为小型猪进一步实验动物化提供遗传基础资料。
1材料与方法试验
1.1试验材料
贵州小型猪的血液样品,来自贵阳中医学院场纯繁小型猪群体,样本数为45头。每头猪耳静脉采血5—10ml,用肝素抗凝,在室温下以1000r/min离心10分钟,吸取上层血浆部分,下层血细胞以5—10倍体积生理盐水洗涤,以1000r/min离心10分钟弃去上清液,重复洗涤1次,向离心的红细胞部分加入少量蒸馏水,使红细胞破裂以制备红细胞溶血液。
1.2血液蛋白电泳
试验采用双垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳法,浓缩胶浓度均3.0%。浓缩胶缓冲液用Tris—HCl, pH6.8。电极缓冲液为Tris—Gly , pH8.3,后白蛋白(Po)、转铁蛋白(Tf)、醋酶(Es)、红细胞葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G—6PD)、乙醇脱氢酶(ADH )、乳酸脱氢酶—1,2 ( LDH—1,LDH—2)、谷氨酸脱氢酶(GLD)分离胶浓度为7.5 %。Pa前白蛋白分离胶浓度为10%,血清淀粉酶(Am)分离胶浓度为8.5%,血液结合素( HPx)和铜蓝蛋白(Cp)分离浓度为8%。血清蛋白染色见文献[1]血液结合素和铜蓝蛋白染色见文献[2]其它同功酶染色见文献[3]。