Y=4.526×106X+5.464×104 r=0.9999

结果表明：葛根素进样量在0.06～0.65μg范围内与峰面积具有良好的线性关系。因此，在线性范围内可采用外标一点法定量。

2.4.4 精密度和重复性试验 取同一对照品溶液，重复进样5次，求得葛根素峰面积的RSD为0.77%。另称取同一批号(080310)样品5份，每份约0.5g，分别按“2.4.9”项下方法制备样品溶液进样测定含量，求得含量的RSD为0.51%(n=5)。

2.4.5 稳定性试验 取供试品溶液1份，在0、2、8、24、48h分别按“2.4.9”项下方法进样测定含量，结果表明在48h内供试品溶液是稳定的。

2.4.6 日内和日间精密度 取同一份对照品溶液，在日内每隔2h取样测定1次，连续5次，求得峰面积的RSD为0.85%(n=5);另取同一批号样品，每天取样按“2.4.9”项下方法测定含量，连续测定5d，求得含量的RSD为0.48%(n=5)。

2.4.7 提取条件选择

2.4.7.1 提取溶剂选择 文献报道[1?2]多用甲醇水提取样品中葛根素，故考察不同浓度甲醇对提取的影响，称取样品5份，每份0.5g，置100ml量瓶中，分别加50%、60%、70%、80%甲醇约150ml，超声处理30min，按“2.4.9”项下方法进样测定含量，根据测定结果，确定用70%甲醇作溶剂。

2.4.7.2 溶剂体积选择 精密称取本品3份，每份0.5g，置200ml量瓶中，分别加70%甲醇80、120、180ml，摇匀，超声溶解30min，按“2.4.9”项下方法进样测定含量，根据测定结果，本法确定加入溶剂体积约120ml。

2.4.7.3 提取时间的选择 精密称取本品5份，每份2.0g，置200ml量瓶中，各加入70%甲醇约180ml，分别超声溶解10、20、30、40、50min，按“2.4.9”项下方法进样测定含量，结果表明，超声处理30min含量已不再增加，故确定超声时间为30min。

2.4.8 加样回收率测定 精密称取已知含量样品9份，每份0.25g，置50ml量瓶中，分别精密加入葛根素对照品溶液(取12.44mg+70%甲醇→20ml)1，2，3ml(0.622，1.244，1.866mg)，再各加入70%甲醇至40ml，超声溶解30min，按“2.4.9”项下方法进样测定含量，计算回收率，得高、中、低3个浓度平均加样回收率分别为101.2%、101.1%、101.4%，RSD分别为1.1%、0.94%、0.41%(n=3)。

2.4.9 样品测定 取本品约20g,研细,再精密称取细粉约0.5g，置200ml量瓶中，加70%甲醇120ml，超声溶解30min，放冷，加70%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取葛根素对照品用70%甲醇配制成浓度约为60μg/ml的对照品溶液,各进样5μl，记录色谱图，按外标法计算葛根素含量，结果见表1。

表1 眼络通颗粒样品测定结果(略)

3 讨论

本制剂处方中川芎、三棱两味中药均含有挥发油，按标准制剂工艺采用水煎煮提取、再浓缩制粒方法，其中的挥发油成分损失较大，影响疗效，且自拟质量标准中制定的川芎挥发油定性鉴别为将样品溶液直接点样于滤纸上，置紫外光灯(365nm)下观察，显亮蓝色荧光。经检测发现，该方法受到样品中相关组分干扰，荧光斑点不明显，缺乏专属性。因此参照中国药典(2005版)一部建。

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