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【摘要】 目的]用高效液相色谱法测定十三味马钱子丸士的宁的含量。[方法]采用HyperClone BDS C18柱(250×4.6mm，5um);流动相为乙腈?0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值为2.8)(21:79);流速1.0ml/min;检测波长260nm;柱温30℃。[结果]士的宁浓度的线性范围为7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，回收率为98.74%(RSD=0.6%)。[结论]本法方便、快速、准确，可用于十三味马钱子丸的质量控制。

【关键词】 十三味马钱子丸;士的宁;高效液相色谱法; 含量测定

Abstract：[Objective]To measure the strychnin content in 13 vomic?nuts with HPLC.[Method]Take the mixed solution of HyperClone BDS C18 column(250×4.6mm，5um),flow phase：acetonitrile-0.01mol/L heptane sodium sulfonate and equal 0.02mol/L patossium dihydrogen phosphate(with 10% phosphoric acid for adjustment,pH being 2.8)(21:79);the flow speed:1.0ml/min;measured wavelength：260nm;column temperature：30℃.[Result]The strychnin concentration is in the linear range of 7.382～366.4μg/ml，r=0.9996，the reclaim rate is 98.74%(RSD=0.6%).[Conclusion]The method is easy,quick and correct,can be used for quality control of 13 vomic?nuts strychnin.

Key words：13 vomic?nuts;strychnine;HPLC;content measurement

十三味马钱子丸具有行气，降血压，化瘀止痛的功效，用于治疗气血上壅的高血压，胸背疼痛，呼吸困难，头晕，耳鸣，牙龈红肿，“冈巴”病亢盛等。士的宁为马钱子中的主要毒性成分，应对其含量进行控制，原标准[1]无控制指标。为了更好的控制该药的质量，本文用HPLC法测定样品中士的宁的含量。

1 仪器与试药

Agilent1200型高效液相色谱仪;乙腈为色谱纯;其它试剂均为分析纯。士的宁对照品购自中国药品生物制品检定所，批号705-9004，供含量测定用。十三味马钱子丸为市售，产地西藏(批号080814，081101，081212)。

2 方法与结果

2.1 色谱条件[2] 色谱柱：HyperClone BDS C18(250×4.6mm，5um);流动相：乙腈?0.01mol/L庚烷磺酸钠与0.02mol/L磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值为2.8)(21:79)[2];流速1.0ml/min;检测波长260nm;柱温30℃。此条件下士的宁与其它组分能达到基线分离，且阴性对照试验无干扰，见图1。

A对照品B十三味马钱子丸C阴性对照

图1 十三味马钱子丸高效液相色谱图(略)

2.2 对照品溶液制备 精密称取士的宁对照品18.32mg，置于50ml量瓶中，加三氯甲烷使溶解，并稀释至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。

2.3 供试品溶液的制备 取供试品(平均丸重为0.4103g)剪碎，取约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加氢氧化钠试液2ml，混匀，放置30min，精密加入三氯甲烷20ml，密塞，称定重量，置水浴中加热加流2h，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，通过铺有无水硫酸钠的滤纸滤过，精密量取续滤液10ml，置分液漏斗中，用1%硫酸溶液振摇提取5次，合并酸液，用30%氢氧化钠试液调节pH值为10～11，用三氯甲烷振摇提取5次(10、10、5、5、5ml)，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇溶解并稀释至10.0ml，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

2.4 阴性样品液的制备 取处方中除马钱子粉外的其他药味，按十三味马钱子丸制备方法制成阴性样品，取约0.4g，按2.3制备方法同法制备。

2.5 线性关系的考察 分别精密量取对照品贮备液0.2、1.0、2.0、4.0、8.0、10.0ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，在上述色谱条件，进样5ul，测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，士的宁的浓度为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：Y=2.68X+11.029，r=0.9996，表明士的宁的浓度在7.328～366.4μg/ml范围内具有良好线性关系。

2.6 重复性试验 精密称取同一批号(080814)的十三味马钱子丸样品6份，分别按供试溶液制备方法制成供试品溶液，测定其士的宁的含量，其RSD为1.97%，说明此方法重复性良好。