R试剂盒进行扩增. PCR反应条件为：变性94℃ 30 s，退火55℃ 45 s,延伸72℃ 1 min，共30个循环;72℃延伸10 min终止反应. 扩增产物用15 g/L琼脂糖凝胶电泳，紫外凝胶成像系统摄影. 检测指标为凋亡调控基因Bax，Bcl?2和Caspase?3，以β?Actin作为内参照. Bax引物序列为：上游5′?TCCAGGATCGAGCAGA?3′，下游5′?AAGTAG AAGAG G GCA ACC?3′(256 bp);Bcl?2引物序列为：上游5′?CTGGTGGAC AA CA TC GC T CTG?3′，下游5′?GGTCTGCTG ACCT CACTTGTG?3′(228 bp);Caspase?3引物序列为：上游 5′?GGAGCTGGACTGTGGCATTGA?3′，下游 5′?CA GTT CTTT C G TGAGCATGGA?3′(232 bp)内参照β?Actin序列为：上游5′?ATT GTAA C CA A CTGGGAC G?3′，下游5′?TTGCCGATAGTGATGACCT?3′(533 bp).

1.2.7Western Blot检测肺组织蛋白和线粒体内蛋白提取后,BCA法测定蛋白含量，按每泳道加总蛋白50 μg进行SDS?PAGE凝胶电泳，湿转致硝酸纤维素滤膜，50 g/L脱脂奶粉室温封闭2 h，加入小鼠抗大鼠Bax，Bcl?2，Caspase?3和Cyt c(1∶1000)一抗，4℃孵育过夜，TBST洗膜4次，每次15 min，加入辣根过氧化物酶标记的二抗(1∶6000)，ECL增强化学发光系统显色20 min，X光片曝光. β?actin作为内参照对上样一致性进行评估. 采用GDS?8000型凝胶成像分析系统进行半定量分析.

统计学处理：应用SPSS13.0进行数据分析，组内比较采用单因素方差分析，大鼠死亡率应用χ2检验，数据以x±s表示. P<0.05为差异具有统计学意义.

2结果

2.1RES对大鼠腹水量、死亡率的影响SO组，SAP组，RES组和DEX组大鼠死亡率分别为：0.0%(0/8);50.0%(8/16);27.3%(3/11);38.5%(5/13). RES和DEX组大鼠死亡率较SAP组明显降低(P<0.05).

2.2RES对大鼠PaO2水平和腹水量的影响SAP组PaO2水平较SO组显著下降，与SAP组比较，RES组PaO2水平明显提高. SO组大鼠腹腔内无腹水，SAP组腹腔内存在大量暗红色血性腹水，RES和DEX组腹水计量结果低于SAP组(P<0.05，表1).

2.3RES对大鼠血浆TNF?α和IL?6水平的影响SAP组TNF?α和IL?6含量较SO组明显升高，在应用RES后，血浆TNF?α和IL?6水平明显下降(P<0.05，表1).表1RES对大鼠PaO2，TNF?α，IL?6和腹水计量的影响

2.4肺脏和胰腺组织病理学改变光镜下观察可见，SO组胰腺组织无明显病理学改变;SAP组胰腺组织实质坏死、出血及炎性细胞浸润均较严重，提示SAP模型建立成功;而RES和DEX组胰腺组织病理改变均较SAP组明显减轻. 组织透射电镜观察可见SAP组肺组织存在典型细胞凋亡、线粒体肿胀、细胞水肿、毛细血管充血、血栓形成等病理改变，而RES组和DEX组肺组织上述变化明显减轻(图1).

2.5RES对肺组织Bax，Bcl?2，Caspase?3 mRNA表达的影响SO组，SAP组，RES组和DEX组肺组织Bax表达水平分别为：(6.09±0.18)%，(13.6±0.87)%，(9.14±0.34)%，(11.78±1.08)%;Bcl?2 mRNA表达分别为：(4.69±0.33)%，(2.58±0.81)%，(5.90±0.50)%，(5.31±0.18)%;Caspase?3 mRNA表达分别为：(4.77±0.47)%，(12.83±0.30)%，(10.11±0.52)%，(11.10±0.85)%. SO组Bax和Caspase?3 mRNA的表达相对较低或不表达;SAP组Bcl?2 mRNA表达水平稍有上升，Bax mRNA表达水平明显上升，RES组和DEX组Bcl?2 mRNA表达水平较SAP组明显上升(P<0.05)，Bax和Caspase?3 mRNA表达水平明显下降(P<0.05，图2).