Mosmann等[11]发现CD4+Th细胞可发展为功能不同的Th1和Th2亚群，它们各自产生特征性细胞因子，并在介导机体免疫应答中扮演着不同的角色。IFN?γ、TNF?α、IL?1α、IL?2、 IL?17、GM?CSF等Th1细胞因子的主要功能是介导细胞免疫、细胞毒性T细胞的生长和活化、巨噬细胞的活化和迟发型超敏反应。IL?4、IL?5、IL?6、IL?10等Th2细胞因子的主要功能是介导体液免疫，促进B细胞生长、活化和分化。Th1细胞分泌IFN?γ，而不分泌IL?4;Th2细胞正好相反，通常以这两种细胞因子作为鉴别Th1、Th2的标志[12]。SLE发病过程中存在明显的细胞因子网络失调、细胞因子谱偏移，许多种细胞因子的异常对SLE的发生发展及其转归过程有着十分重要的意义。Kyriakos等[13]提出了细胞因子参与SLE的免疫调节紊乱的模型：疾病早期，是Th1型细胞因子在发挥作用，一旦T细胞被自身抗原激活，就产生自身抗体并累及终末器官，同时，INF?γ诱导单核细胞活化，产生前炎症因子IL?1、TNF?α，而且单核细胞也分泌IL?6、IL?10，促进B细胞分化，产生大量自身抗体，病情进一步发展。Th1/Th2两个亚群的调节和平衡作用，在很大程度上是由Th1和Th2类细胞因子之间的相互作用所介导的。由于细胞因子彼此之间相互诱导、协同、叠加或拮抗形成了非常复杂的作用网络，对单一细胞因子的检测分析难以体现和说明机体细胞因子网络状态以及复方中药的作用机理。

基于微球技术的液相蛋白流式检测——Flowcytomix技术，类似于流式微珠阵列(cytometric bead array，CBA)技术，但检测指标更多;较之于传统的单克隆抗体酶联免疫吸附(ELISA)检测技术，多项指标的检测只需制备一组标准曲线，一次采样，大大节省样本，缩短检测时间，提高效率，具有更高的灵敏度和更好的重复性，更重要的是能最大限度地消除不同反应体系所带来的各种误差和同一反应体系内各细胞因子间的交叉反应。较之于Luminex液相蛋白芯片技术，该技术实验过程在普通的流式细胞仪上即可完成。

本研究对中药复方狼疮Ⅱ号等不同措施干预治疗MRL/lpr狼疮鼠模型后其外周血多种Th1/Th2细胞因子的影响进行芯片式集成检测，从整体和同步的角度观察了各干预措施对MRL/lpr狼疮鼠细胞因子网络的调节模式。结果表明，10种细胞因子中，空白对照组IFN?γ、TNF?α、IL?17、IL?4、IL?5、IL?10水平高于各治疗组(P<0?05或P<0?01)，其IL?2水平则低于各治疗组(P<0?05或P<0?01);中西结合组IL?6、IL?10、IFN?γ和TNF?α水平显著低于单纯中药组和西药组(P<0?05或P<0?01)。皮质激素是目前临床治疗SLE的主要药物之一，但其具体作用机制并不十分明确。本研究结果提示糖皮质激素能降低MRL/lpr狼疮鼠IFN?γ、IL?6、IL?10水平，并在一定程度上逆转MRL/lpr狼疮鼠的Th1偏移，调节Th1/Th2类细胞因子网络平衡，中药治疗具有一定的协同调节作用。值得注意的是各治疗组IL?2水平差异无显著性意义，但显著高于空白对照组，提示中药对MRL/lpr狼疮鼠IL?2表达水平具有提高作用，与糖皮质激素比较其是否具有浓度依赖性的双向调节作用尚需深入研究。

本研究初步揭示了中药复方狼疮Ⅱ号对MRL/lpr狼疮鼠血清10种细胞因子谱的影响，我们认为Flowcytomix技术能同步、客观地反映Th1/Th2细胞因子的变

化和平衡状态，有利于探讨细胞因子间的相互影响和网络效应。狼疮Ⅱ号可能通过调节Th1/Th2细胞因子网络的平衡，影响B细胞、T细胞过度活化，主要抑制IFN?γ和前炎性因子TNF?α的分泌、提高IL?2表达水平而发挥治疗作用。由于细胞因子网络调控的复杂性以及中药复方多靶点作用机制的特点，狼疮Ⅱ号更确切的作用机制有待深入验证和探讨。

【参考文献】