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浅谈重复给烟碱引起大鼠降温耐受性反应及对活动和体重的影响

作者：杨永录 黄涛 孟立 沈字玲 韩琴

【摘要】 目的 观察重复给烟碱引起大鼠降温耐受性反应以及对活动和体重的影响。 方法 用无线遥测技术监测大鼠的体温和活动，观察连续5天重复注射小剂量烟碱(0.5 mg/kg )对SD大鼠体温、活动和体重的影响。结果 ①第一次给大鼠注射烟碱后可导致大约持续1.5 h的降温反应;但第三次注射烟碱后，雄性和雌性大鼠体温则与对照组相似。②重复给烟碱可以明显降低体重。③每次注射烟碱和生理盐水可引起动物的活动出现短暂的增加反应;从第二次到第五次注射烟碱后雌性大鼠的活动明显多于雄性大鼠。结论 重复注射烟碱可导致雄性和雌性大鼠出现降温耐受性反应，但连续注射烟碱后，雌性大鼠的活动明显大于雄性大鼠。另外，重复给烟碱可降低雄性和雌性大鼠的生长速度。

【关键词】 烟碱; 低温; 体温过高; 性别差异

【Abstract】 Objective To observe the repeated nicotine exposure lead to tolerance of hypothermic effect and the effect on motor activity and body weigh in rats. Methods The effects of daily injections of nicotine at small dosage (0.5 mg/kg) once a day for 5 days on core temperature and motor activity in male and female Sprague?Dawley rats were monitored by radio telemetry. Results ①The first injection of nicotine in rats led to a hypothermic response for approximately 1.5 hours. But after the third injection of nicotine, changes of core temperature in male and female rats were similar to controls. ②Repeated treatment with nicotine significantly reduced body weight.③Motor activity also increased transiently with each injection of saline and nicotine, but the motor activity response of females was significantly greater than the males for the second through fifth injections of nicotine. Conclusion The results of this study show that repeated injection of nicotine can lead to tolerance of hypothermic response, but motor activity response of females was significantly greater than the male rats after sequential nicotine injections. In addition, repeated nicotine treatment attenuated the growth of male and female rats.

【Key words】 Nicotine; hypothermia; tolerance; body weight

下丘脑体温调节中枢内含有丰富的烟碱型胆碱受体(N受体)和毒蕈碱型胆碱受体(M受体)，二者均参与人体和哺乳类动物体温调节过程。M受体激动剂氧化震颤素和N受体激动剂烟碱均可穿过血脑屏障进入中枢引起啮齿类动物出现明显的降温反应[1?2]。虽然实验已经证明，烟碱不仅参与降温过程，而且反复给烟碱可以出现降温耐受性反应或影响乙酰胆碱受体的敏感性[2?4],但未见小剂量烟碱引起体温变化和耐受性反应的时间曲线特点以及活动和体重变化与性别差异的报道。作者考虑无线遥测技术不仅能够连续准确记录反复给药引起体温和活动的变化，而且也可避免人工反复测量结肠温度引起动物活动改变和应激性体温过高对实验结果的影响。因此，本实验用无线遥控测温技术连续观察给大鼠重复小剂量注射烟碱是否可产生降温耐受性反应，同时也希望证明重复注射烟碱对动物活动和体重的影响与性别的差异。

1 材料和方法

1.1 实验动物与试剂

实验用成年雄性和雌性SD大鼠(四川医学科学院实验动物研究所提供)，体重200～250g。酒石酸氢烟碱(Nicotine hydrogen tartrate)为Sigma公司产品，用生理盐水配制成实验所需要的不同剂量浓度。

1.2 实验分组与步骤

实验分为两部分完成。实验1：不同剂量烟碱对雄性和雌性大鼠体温和活动的影响。雄性和雌性大鼠各分4组(n=7)，即为生理盐水组以及0.25 mg/kg、0.5 mg/kg和0.75 mg/kg烟碱组，注射容量均为1ml/kg。实验前1天下午4时，将大鼠放入清洁鼠笼内，然后置于SH?800GS人工气候箱(重庆永生实验仪器厂产品)内进行适应性过夜，动物处于自由活动、进食和进水状态。人工气候箱内温度设定为25℃，湿度为70%～80%左右，明暗时间各为12 h，上午6时开灯，下午 6时关灯。实验当天上午6时开始连续记录大鼠的体温和活动，上午11时分别给动物皮下注射不同剂量的烟碱或生理盐水后，连续记录到下午3时结束实验。

实验2：小剂量重复皮下注射烟碱对体温、活动和体重的

影响。雄性和雌性大鼠各分2组(n=7)，即生理盐水组和烟碱组。 实验前2天下午4时，将大鼠置于人工气候箱中，人工气候箱参数设定同实验1。实验前1天上午6时开始连续记录体温和活动，实验当天上午11时分别皮下注射烟碱0.5 mg/kg(0.5mg/ml生理盐水)或生理盐水1 ml/kg，每天注射1次，连续注射5天。

1.3 动物手术

用4%戊巴比妥钠溶液腹腔注射麻醉(40 mg/kg)动物，按照常规手术方法切开腹部皮肤和肌肉，植入无线温度遥测探头( Data Sciences international, model TA10TA?F40 )后，缝合腹部肌肉和皮肤，然后肌肉注射青霉素以防感染。术后将动物分别单个饲养在大鼠塑料笼中恢复10天以上进行实验。实验室的温度为23℃～25℃左右，明暗时间各为12 h，上午6时至下午6时为昼光(开灯)，下午6时至第二天上午6时为暗光(关灯)。

1.4 体温的测量和判定体温变化的指标

用无线遥控测温系统(美国DSI公司产品)测量大鼠的体温，将腹腔内置有无线温度遥测探头的大鼠放入清洁鼠笼内，然后置于遥控测温仪的接收板上，大鼠腹腔内无线遥测探头每间隔5 min采集一次体核温度信号，经接收板接收后，输入计算机储存和数据处理。

体温反应指标用平均体温反应曲线和体温反应最大幅度与基线体温之间的差(△T)表示。

1.5 体重的称量