精密吸取对照品溶液2uL与4uL，供试品与阴性液各6uL，点样于同一硅胶G薄层板上，按2.4.1项下色谱条件展开，晾干，显色测定，绘制薄层光谱图。结果表明，对照品与供试品，可见光区内吸收峰峰形、峰位完全相同，且在520nm波长处有最大吸收，阴性液在此波长下无干扰。在与对照品色谱相应位置处，供试品具有相同位置的色谱峰，阴性液在此峰位无吸收。

2.4.4 标准曲线绘制

精密称取熊果酸对照品3.3mg，置5ml量瓶中，加无水乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取1.0、2.0、3.0、4.0、5.0uL，点样于同一硅胶G薄层板上，按2.4.1项下色谱条件测定，以进样量(ug)为横坐标，以色谱峰面积(A)为纵坐标，绘制标准曲线，经回归处理，得回归方程为Y=19606.4x-2771.8(r=0.9990)，表明熊果酸点样量在0.66～3.30g范围内线性关系良好。

2.4.5 精密度试验

取样品5g，精密称定，按2.4.2.2项下方法制备供试品溶液。

2.4.5.1 同板精密度试验

精密吸取同一供试品溶液6uL，在同一硅胶G薄层板上，重复点样6次，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明同板精密度为1.3%。

2.4.5.2 异板精密度试验

精密吸取供试品溶液6uL、对照品溶液(0.4mg?mL-1)2uL与4uL，分别点予6块硅胶G薄层板上，按 2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明异板精密度为2.6%。

2.4.6 稳定性试验

取样品5g(批号：021201)，精密称定，按2.4.2.2项下方法制备供试品溶液。将供试品溶液分别间隔不同时间测定，结果见表1。结果表明，供试品溶液在2小时内测定，熊果酸含量无变化。

Table 1 Result of stability test

2.4.7 重复性试验

取样品(批号为021201)6份，分别照2.4.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果见表2。

Table 2 result of repeating experiment

2.4.8 加样回收率试验

精密称取已知准确含量的样品(批号021201)5g，加入浓度为0.6mg?mL-1的对照品溶液2.0ml，按 2.4.2.2项下方法制备供试品溶液，按2.4.1项下色谱条件展开，测定，结果表明平均回收率为96.5%，RDS为1.6%。

2.4.9 含量测定

2.4.9.1 提取方法

根据待测组分熊果酸易溶于乙醚性质，以乙醚为溶剂，分别采用直接回流提取法，索氏提取法、超声提取法提取，结果见表3。根据测定结果，确立以索氏提取4小时为最佳提取方法。

Table 3 result of observing the pick-up method

2.4.9.2 样品测定

取样品10批，照2.4.2项下方法制备供试品溶液和对照品溶液。吸取供试品溶液5μl，对照品溶液3μl与6μl，分别交叉点于同一含0.2%羧甲基纤维素钠溶液为粘合剂的硅胶G薄层板上，以氯仿-丙酮-冰醋酸(18：2：0.2ml)为展开剂，置用展开剂饱和20分钟的层析缸内，展开，展距12cm，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在110℃烘至斑点显色清晰取出，在薄层板覆盖同样大小的玻璃板，周围用胶布固定，进行薄层扫描，波长：λS=520nm，λR=700nm，测量供试品吸收度积分值与对照品吸收度积分值，计算熊果酸含量，结果见表4。

Table 4 result of determining the content of ursolicocid (n=3)

3　讨论

熊果酸为山楂中有机酸成分之一，经参考有关文献，拟以薄层扫描法测定本制剂中熊果酸含量，经反复筛选溶剂系统，在现行色谱条件下，熊果酸与其他组分分离很好，阴性液无干扰，方法回收率为96.5%，方法学考察结果表明，精密度，稳定性、重现性均良好，可作为键儿厌食康颗粒剂中熊果酸含量测定方法。

参 考 文 献

[1]国家药典委员会.中华人民共和国药典[Z].北京:化学工业出版社,2005:22.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[Z].北京:化学工业出版社，2005:193.

[3]卫生部药政局. 新药(中药)研究指南[S].北京:中国医药科技出版社,1993.

[4]江苏新医学院.中药大辞典[M].上海:上海科技出版社,1977:170.

[5]曹春林.中药药剂学[M].上海:上海科学技术出版社,1986:217-227

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