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脑挫裂伤是一种常见病,随着社会经济水平不断提高及交通工具的发展,脑挫裂伤的发病率持续升高。而小儿活泼好动,其独立和自身保护能力差,故脑挫裂伤的发病率较成年人上升快。因此深入探讨小儿脑挫裂伤的病理生理变化有利于其诊断、治疗和疗效评估,是当前研究热点之一。脑红蛋白 (neuroglobin,Ngb)是继血红蛋白和肌红蛋白之后新发现的一种主要位于神经元内、能够可逆性结合氧的球蛋白。研究表明Ngb主要参与氧在中枢神经系统中的转运与贮存,在神经系统氧摄取、氧运输和氧利用等过程中起着极其重要的作用[1-2],并作为一种内源性神经保护因子,在脑保护、改善神经功能和预后方面起着重要的作用。本课题组前期研究显示,脑外伤后脑组织中NgbmRNA的表达明显升高[3],但有关Ngb在小儿脑挫裂伤病理生理过程中的变化尚不明确。本研究以脑挫裂伤患儿的脑组织及血清为样本,采用二维凝胶电泳和质谱技术分离、鉴定差异表达蛋白质,并运用免疫组化和酶联免疫法鉴定并观察了差异蛋白Ngb在脑挫裂伤患儿脑组织及血清中表达水平的动态变化,以阐明Ngb在小儿脑挫裂伤病理生理过程中的变化。

1资料与方法

1.1研究对象2011年8月~11月于中南大学湘雅医院就诊的脑挫裂伤患儿15例,其中男10例,女5例,年龄6~14岁,平均年龄9.0±1.8岁,受伤部位均为额叶。

1.1.1脑组织来源及分组15例脑挫裂伤患儿中,取8例重型颅脑外伤后患儿脑组织,其中男6例,女2例,年龄为6~14岁,平均年龄9.0±1.6岁, 受伤部位均为右额叶。GCS评分为5~8分,血肿均由CT或MRI检查证实。另选取3例脑室肿瘤患儿为对照,在行肿瘤切除术过程中取得正常额叶皮层组织。部分标本在切除后立即置液氮中保存,供蛋白质检测;另一部分标本经4%多聚甲醛固定18h,常规脱水、石蜡包埋、4μm连续切片,供免疫组化检测。