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2013-12-13
图1对照品(A)、样品(B)及空白对照(C)高效液相色谱图(1.异烟肼) 略5线性关系考察分别精密量取0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL对照品贮备液,置50mL量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,依法测定,记录色谱图,以峰面积(A) 为纵坐标、质量浓度(ρ)为横坐标计算得回归方程:A=32.697ρ-14.975,r=0.9999。结果表明,异烟肼在 9.90~99.00μg·mL-1范围内线性关系良好。6精密度试验取对照品溶液,连续重复进样5次,结果峰面积的RSD为0.04%,表明方法精密度良好。7重复性试验取同一批号异烟肼注射液(061101)5份,依法测定,计算,结果异烟肼含量的RSD为0.4%,表明方法重复性较好。8稳定性试验取供试品溶液于0、3、6、12、24、48h分别依法测定,记录色谱图,结果峰面积的RSD为0.6%,表明供试品溶液在48h内稳定。9回收率试验精密量取已知含量为1.023mg·mL-1的异烟肼注射液(批号061101)1.0mL,置50mL量瓶中,分别精密加入对照品贮备液 (0.9900mg·mL-1)0.8、1.0、1.2mL,加水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液,依法测定。结果见表1。
表1异烟肼回收率试验结果 略10样品测定取本品,按“2.2”项下的方法制备供试品溶液,依法测定,记录色谱图,按外标法计算异烟肼含量。同时采用溴酸钾法测定含量。结果见表2。
表2样品测定结果略
3讨论1测定波长的选择照紫外?可见分光光度法,取对照品溶液在200~400nm的波长范围内扫描,绘制吸收光谱图,测得异烟肼的最大吸收波长为 262nm;另取空白对照溶液在此范围内扫描,发现在异烟肼最大吸收峰处无干扰,故选择262nm为检测波长。2流动相的选择曾选用不同比例的甲醇?0.075mol·L-1磷酸二氢钠溶液、乙腈?0.025mol·L-1磷酸二氢钠溶液、乙腈?0.075mol·L-1磷酸二氢钠溶液为流动相进行试验,发现以乙腈?0.075mol·L-1磷酸二氢钠溶液(体积比5∶95)为流动相的测定结果比较理想,故确定以此为流动相。3本法与现有药品标准方法的比较经试验,本文方法与溴酸钾法[1]测定异烟肼注射液的含量结果无显着差异,且本法灵敏度高,专属性强,快速准确,重复性好,可用于异烟肼注射液含量测定。
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