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银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测

编辑:sx_wangha

2013-12-13

精品学习网论文频道一路陪伴考生编写大小论文,其中有开心也有失落。在此,小编又为朋友编辑了“银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax的检测”,希望朋友们可以用得着!

为了探讨细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas、bax在银屑病发病中的意义,采用免疫组化ABC法、SABC法检测了这几种基因在15例银屑病组织中的表达。结果发现银屑病的角质形成细胞中抑凋亡基因bcl-2几乎不表达,促凋亡基因Fas、bax阳性表达。提示促凋亡基因Fas、




bax在银屑病中发病起重要作用,而抑凋亡基因bcl-2作用可能不大。
关键词银屑病、cl-2基因、Fas基因、ax基因。
银屑病的发病机理尚不明确,角质形成细胞异常增生和角化不全是银屑病的主要病理改变,以往对这方面的研究主要集中在免疫学和生化学方面。近年来银屑病与细胞凋亡的关系逐渐受到越来越多学者的重视。国外有学者报道银屑病表皮中角质形成细胞凋亡异常增多。抑凋亡基因bcl-2和促凋亡基因Fas、bax是现今研究较多、较重要的几个细胞凋亡相关基因。为了探讨这几种基因在银屑病发病中的意义,我们采用免疫组化方法检测了银屑病中细胞凋亡相关基因bcl-2、Fas及bax。
1材料和方法
1.1标本来源:采用1994-1997年我院保存的石蜡包埋组织块。寻常型银屑病15例,其中男8例,女例;年龄11-68岁,平均年龄29.13岁;均为进行期银屑病。6名正常人皮肤组织,皆取自皮肤外科行重睑术、面部美容切除术者的皮肤,石蜡包埋作为对照组。测定前先将石蜡包埋组织块作常规组织切片及HE染色,在光镜下核对诊断,证实其病理诊断无误方采用。
1.2试剂:鼠抗人bcl-2单克隆抗体购自Dako公司,生物素化羊抗鼠单克隆抗体系华美生物制品公司产品。兔抗人Fas多抗、兔抗人bax多抗及链酶亲和素-生物素-过氧化酶复合物免疫组化试剂盒(简称SABC试剂盒)均购自武汉博士德生物工程公司。
1.3方法:载玻片用APES处理后干燥备用,切取4-5μm厚的石蜡切片,常规脱蜡水化。Bcl-2基因的检测参照ABC法稍加改进,阳性对照为正常淋巴结,阴性对照为不加一抗。Fas、bax基因的检测采用SABC法,阳性对照分别为武汉博士德生物工程公司提供的Fas、bax基因阳性对照片,阴性对照为不加一抗。
1.4判断:显微镜下观察,棕黄色为阳性结果。阳性强度判断标准如下:强阳性( )指50以上细胞阳性染色;中等强度阳性( )指25-50细胞阳性染色;弱阳性( )指25以下细胞阳性染色;阴性(-)指细胞均无任何阳性染色。

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