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2015-09-24
来自Vacanti实验室的线索也提示,他自己也被实验假象蒙蔽。STAP论文发表时,哈佛大学干细胞学家George Daley实验室开发出一种分析单细胞基因活性的方法,Daley联系Vacanti,建议使用这个方法帮助他们鉴定细胞来源,Vacanti完全接受这一建议,并邀请Daley的学生Alejandro De Los Angeles参观他如何制作STAP细胞。Daley很快发现Vacanti的实验结果属于假象。
STAP是使用携带Oct4报告基因标记动物,这种动物一些细胞能在某波长照射下发出绿色荧光,因这些基因只在干细胞中表达,所以可根据这一特征鉴定是否属于干细胞。非常不幸的是,酸处理细胞也能发出荧光,这导致这些学者误认为这些酸处理细胞来自原来的动物细胞。De Los Angeles对这些实验进行重复时,也能看到这些细胞发出的绿色荧光。
不过这种酸处理导致的荧光强度远远低于报告基因引起的荧光,这种酸诱导的荧光属于一种细胞自发荧光的普遍现象,这种现象在许多细胞都可以发生,主要发生在细胞处于死亡或不健康状态下。因此只要对荧光显微镜观察比较熟悉,就不会出现这种低级错误的判断。
北京大学教授Hongkui Deng认为,熟悉的学者把这种现象和报告基因的荧光混淆是不容易的。但是没有实验经验的学者则有可能。
STAP细胞论文宣称这种细胞能形成畸胎瘤,这种肿瘤组织包括多种组织细胞类型,给免疫功能缺陷动物注射异体细胞时也可以发生这种结果。Vacanti和小保方等使用了一个经过改造的技术,先将细胞接种在聚合物凝胶内,然后给动物皮下注射。Daley重复该研究,发现这种方法只能产生瘢痕组织,不会形成畸胎瘤。Vacanti拒绝对最新这一论文评论。
Daley说,STAP细胞发表后几个月,许多重复该研究的实验室都发现类似现象,这些科学家开始对这些结果进行比较,所有人都发现是因为实验假象。最后大家决定应该把这些数据进行汇总投稿给《自然》杂志,给这一悬疑论文一个说法。
这一论文包括对STAP论文数据的重新分析,他们确认了RIKEN的调查结果,供体动物属于雄性,但是论文报道的STAP细胞来自雌性。他们还有数据支持,这种STAP细胞携带滋养层干细胞特定遗传标记,这种细胞是形成胎盘的细胞,也是一种胚胎干细胞系。这些结果绝对不可能是用酸处理能产生的结果,因为这些细胞需要不同的细胞培养条件。
编辑老师在此也特别为朋友们编辑整理了验证STAP细胞的研究论文。
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